冷胁迫是反应农饲料作物出现的重点的环境对战的一个。钙依靠性球蛋白激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）警报传接到细胞系并激活码对逆境中成长运行的关键因素调试因素，但其国家宏观调控机理尚不看清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化绘制位点判断服务。

国外英文名称：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

2英文文章标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

客人单位名称：浙江大学

的研究物料：番茄

拜谱具备技术设备：磷碱化绘制位点查重

科研总体目标：

一、研发最后

1、CPK27在超高温胁迫下表示上涨，若想怎强根系耐寒性性

继往理论钻研说明，CPK27在冷胁迫平均的水平下抒发上涨。为手机验证这最终，从文中中创作者利用CPK27的这两个敲除变异系（cpk27 #2，#6）实现耐低温性性测试图片，发觉CPK27的转录平均的水平明显性优于对比组（图1a-b）。在CPK27抒发被可抑制的植被中，对耐低温性性的增強帮助明显性变弱。进步的亚神经元wifi定位与刺激理论钻研说明，冷胁迫提升CPK27向神经元核积少成多，并增強其磷碱化平均的水平（图1 f）。免疫抗体印刷痕迹具体分析进步核实冷胁迫诱导性 CPK27 在核内球蛋白丰度加强、胞内丰度缩减，外源CaCl₂治理 可部门恢复过来cpk27的冷强烈表型，说明CPK27依靠Ca²⁺卫星信号发挥出来帮助。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖性的方式提升番茄耐冷性

2、CPK27经由调节管控黄胺类合并行业调理超高温拉伤

转录组测序但是显视，CPK27的过把你想表达出来爱同质性上涨黄胺类怪物制作而成有关基因遗传遗传，如CHS、CHI和FLS等，互相黄胺类基础代谢通道同质性丰度。而CPK27突变率体中以下基因遗传遗传把你想表达出来爱下跌，表示CPK27可以通过加快黄胺类制作而成有助于植物体减缓低温环境胁迫分享的钝化重压（图2a-e）。

图2 RNA-seq深入分析CPK27调节的冷卡死表观遗传

3、HY5是CPK27介导的抗寒数据信号通路中的关键的靶标

为核验 CPK27 与 HY5 的之间用，小说作者第一个确定了酒曲双杂交育种（Y2H）测试，最终没想到得知两种存有之间用（图3a）。双碳原子荧光互补式（BiFC）测试进的一步意味着CPK27 与 HY5 在生殖细胞内会出现之间用（图 3b）。随着依据免疫系统共沉定等能力，遇到HY5与CPK27在植被人体存有之间用，且两种的之间用含有钙阴阳离子（Ca²⁺）依赖关系性（图 3c）。不仅，在Co-IP测试的球蛋白转化成前产生冷胁迫外理，最终没想到提示冷胁迫可增强学习HY5与CPK27的之间用（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其最为关键的位点

4、CPK27磷碱化HY5强化其转录抗逆性，利于黄吩噻嗪表观遗传抒发

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷硝化作用绘制位点在线检测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷碱化HY5并增加其安全性

5、CPK27 在类黄酮菌物分解径路中意义于HY5的中上游

综上基因遗传形容和排泄物概述成果（图5），CPK27在冷胁迫运行历程中的功效于HY5的上中下游，按照改善 HY5 介导的类黄酮生物工程分解信号通路后果苔藓植物耐旱性。

图5 CPK27用处于HY5长江上游

二、原创文章总结ppt

以上所讲，此文论述表述CPK27磷过酸体现HY5蛋白质，刺激类黄酮制成手段，利于抗氧化性反应物资积少成多，行而改善耐低温水平。该论述确立了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节管控机制化（图6），印证CPK27介导的HY5磷过酸是拼接钙移动信号与次生分解攻击的核心方式，为认为绿色植物顺境为了响应网格带来了了新视距。

图6 CPK27-HY5传感器增加树种耐热冷胁迫的系统

三、拜谱个人心得体会

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清酶质组学、绘制血清酶质组学、新陈代谢组学、转录组学等两组学物品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参阅文献综述：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134